液相色譜柱是液體色譜分析儀的核心組件,由柱管、篩板、接頭等部件構(gòu)成,主要分為分析型、制備型和保護柱三類。分析型色譜柱根據(jù)內(nèi)徑差異分為常規(guī)分析柱(4.0-4.6mm)、窄徑柱(1.0-2.1mm)及毛細管柱(0.2-0.5mm),制備型則涵蓋半制備柱(5-10mm)和制備柱(21.2-50mm)。
填料基質(zhì):
1.硅膠基質(zhì)-pH 2-8-高或低pH下,硅膠會溶解。
2.Al2O3·nH2O-pH1-14-化學(xué)修飾困難。
3.聚合物基質(zhì)-pH1-14-孔結(jié)構(gòu)復(fù)雜,孔徑不均勻?qū)е轮Р粔蚋?,有機溶劑可能導(dǎo)致聚合。物基質(zhì)溶漲而受損
在選擇色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等。
1.若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因為這樣可增加堿性樣品的保留。
2.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱。
3.如果樣品極性太強或酸性太強;可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長,對流動相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實驗,另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗)。